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熒光壽命成像(Fluorescence Lifetime Imaging, FLIM)是一種利用熒光分子在激發(fā)態(tài)的平均停留時(shí)間(熒光壽命)來(lái)生成圖像的技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)能夠提供比傳統(tǒng)熒光強(qiáng)度成像更多的信息,因?yàn)樗皇軣晒夥肿訚舛?、激發(fā)光強(qiáng)度和光漂白效應(yīng)的影響,可以更精確地反映熒光分子與周圍微環(huán)境的相互作用。
光譜測(cè)量數(shù)據(jù)采集卡是用于光譜分析系統(tǒng)中的關(guān)鍵組件,負(fù)責(zé)將光電探測(cè)器檢測(cè)到的光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)并進(jìn)行數(shù)字化處理,以便于后續(xù)的數(shù)據(jù)分析和處理。
光譜測(cè)量數(shù)據(jù)采集卡
光譜測(cè)量數(shù)據(jù)采集卡的優(yōu)勢(shì):
多通道能力:光譜測(cè)量數(shù)據(jù)采集卡具備多通道輸入能力,它具有11個(gè)SMA單端輸入和13個(gè)USB-C LVDS可配置輸入/輸出通道,適合多通道數(shù)據(jù)采集需求。
高精度時(shí)間分辨率:光譜測(cè)量數(shù)據(jù)采集卡,可達(dá)到最小時(shí)間分辨率為48ps,單次測(cè)量精度小于300ps,適用于對(duì)時(shí)間分辨率要求極高的應(yīng)用。
便攜性與易用性:光譜測(cè)量數(shù)據(jù)采集卡設(shè)計(jì)緊湊便攜,尺寸小巧,重量輕,且為USB供電,便于攜帶和使用。
熒光壽命成像技術(shù)的優(yōu)勢(shì):
定量分析能力:FLIM技術(shù)能夠提供熒光分子在激發(fā)態(tài)的平均停留時(shí)間,即熒光壽命,這一參數(shù)與熒光分子的濃度無(wú)關(guān),提供了一種定量分析的手段。
環(huán)境敏感性:熒光壽命對(duì)熒光分子周圍微環(huán)境的變化非常敏感,能夠反映分子與環(huán)境的相互作用,如pH值、離子濃度、粘度等。
高特異性:FLIM技術(shù)可以區(qū)分光譜特性相似的不同熒光團(tuán),提高了成像的特異性。
抗干擾能力強(qiáng):與熒光強(qiáng)度成像相比,FLIM不受熒光分子濃度、激發(fā)光強(qiáng)度或光漂白效應(yīng)的影響,能夠提供更可靠的數(shù)據(jù)。
適用于動(dòng)態(tài)過(guò)程監(jiān)測(cè):FLIM技術(shù)可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞或組織中發(fā)生的動(dòng)態(tài)變化,如細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、代謝活動(dòng)等。
無(wú)需標(biāo)記或低標(biāo)記需求:FLIM技術(shù)可以利用細(xì)胞內(nèi)的自發(fā)熒光分子進(jìn)行成像,減少了對(duì)外源熒光染料的依賴,降低了對(duì)生物樣本的干擾。
結(jié)合FRET技術(shù):FLIM技術(shù)可以與熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)技術(shù)結(jié)合使用,探測(cè)分子間的相互作用和距離變化。
高空間分辨率:結(jié)合共聚焦顯微鏡或超分辨成像技術(shù),FLIM可以實(shí)現(xiàn)更高空間分辨率的成像。
多參數(shù)成像:FLIM技術(shù)可以同時(shí)測(cè)量多個(gè)熒光參數(shù),提供更全面的生物信息。
臨床應(yīng)用潛力:FLIM技術(shù)在疾病診斷、治療監(jiān)測(cè)以及藥物開(kāi)發(fā)中具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。
光譜測(cè)量數(shù)據(jù)采集卡接口及連接類型
熒光壽命成像(FLIM)技術(shù)因其能夠提供關(guān)于熒光分子與周圍微環(huán)境相互作用的獨(dú)特信息,而在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用:
細(xì)胞微環(huán)境監(jiān)測(cè):FLIM技術(shù)能夠通過(guò)測(cè)量細(xì)胞內(nèi)熒光分子的壽命變化來(lái)監(jiān)測(cè)細(xì)胞微環(huán)境,這對(duì)于理解細(xì)胞功能和細(xì)胞間信息傳遞至關(guān)重要。
疾病診斷和治療監(jiān)測(cè):FLIM技術(shù)可以應(yīng)用于疾病控制和藥物療效的監(jiān)測(cè),例如通過(guò)監(jiān)測(cè)細(xì)胞內(nèi)NAD(P)H和FAD的熒光壽命變化來(lái)評(píng)估抗癌藥物的治療效果。
生物分子相互作用研究:通過(guò)FRET-FLIM技術(shù),可以探測(cè)蛋白質(zhì)之間的相互作用、核酸鏈的雜交或分裂等,為研究分子層面的生物學(xué)過(guò)程提供了有力工具。
自發(fā)熒光FLIM:利用生物細(xì)胞內(nèi)源的熒光分子,如NAD(P)H和FAD,F(xiàn)LIM技術(shù)可以監(jiān)測(cè)細(xì)胞代謝狀態(tài),無(wú)需外加熒光染料,減少了對(duì)樣品的干擾。
外源分子探針FLIM:通過(guò)使用外部熒光染料,FLIM技術(shù)可以用于特定生物分子的成像和分析,這些探針對(duì)物理?xiàng)l件如粘度、溫度、pH等敏感,有助于研究細(xì)胞環(huán)境。
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